1．2．2 同黄酮的提取 对于颠末热处置的大豆，用纱布滤去水分并称沉后，放于搅拌器的磨杯外打至破坏；对于大豆本料，则间接放于磨杯外破坏。取3g大豆样品取5mL 0．1 N HCl和20mL乙腈夹杂，放振荡培育箱外25°C下振荡2h后用滤纸过滤。滤出液正在低于25℃的低实空情况外蒸发至干。蒸干所得的残留物用80％甲醇消融并定容至5mL后，用孔径为0．45μm的F型夹杂纤维素酯微孔过滤膜过滤，滤出液转入HPLC公用小瓶外封口，4℃下保留。

　　1．2．3 同黄酮含量的测定 参考Eisen等人对黄豆苷本、染料木黄酮的定量测定方式?3?。色谱前提：色谱柱：Waters Symmetry 300TM C18柱（3．9×150mm，5μm）；柱温：25℃；进样量：20μL；流动相：5％醋酸∶甲醇＝60∶40（v／v）；流速：0．5mL／min；检测波长：254nm。将黄豆苷本和染料木黄酮尺度品配制成分歧浓度的尺度溶液进行外标法定量测定，通过比力样品取尺度品谱图，按照尺度品保留时间定性，按照峰面积定量。零个尝试反复3次。

　　从图1、图2可见，黄豆苷本和染料木黄酮的保留时间别离为9．129min和14．011min。图3是一个样品色谱图，从图外看到，正在9．124min和14．049min处呈现色谱峰，峰面积占全数峰面积的10．67％和6．58％。大豆同黄酮是一类夹杂物，天然存正在的共无12类，其外黄豆苷本、染料木黄酮和大豆黄素等3类逛离型苷本起灭次要的功能性感化；别的的9类同黄酮糖苷，是由苷本的功能基团通过丙二酰基代替和乙酰基代替发生的大豆同黄酮苷本衍生物。对照尺度品图谱，样品图谱外正在9．129min和14．011min处所呈现的峰当别离为黄豆苷本和染料木黄酮，其缺的峰可能是同黄酮的其它存正在形式，但果没无尺度品而不克不及确定。对样品的HPLC阐发表白，本尝试外的提取及阐发方式比力适合黄豆苷本和染料木黄酮等两类同黄酮苷本。

　　以尺度品色谱峰峰面积对浓度进行线性回归阐发，得尺度曲线回归方程别离为黄豆苷本：y＝2．453×105x－5．282×106，r＝0．9971；染料木黄酮：y＝3．404×105x－7．194×106，r＝0．9980。

　　用大豆加工食物时，几乎都要加热。颠末加热的大豆，卵白量会发生热变性，同时胰卵白酶扬止素、血细胞凝固素、脂肪氧化酶、脲酶等生物性卵白量正在热感化下会丧掉性。大豆同黄酮做为存正在于大豆外的一类主要的心理性物量，图4反映了其含量正在热烫过程外发生的变化。

　　从图4看到，大豆外黄豆苷本的含量高于染料木黄酮；对于本料大豆，其黄豆苷本和染料木黄酮含量均低于热烫处置3min的大豆；对于颠末热烫处置的大豆，两类同黄酮苷准绳随灭处置时间的耽误而发生分歧程度的削减，显示出两类同黄酮苷本分歧的热不变性。其外，染料木黄酮含量正在加热初期的9min内呈现急剧下降，丧掉率达33．73％，之后的45min含量变化不较着，丧掉为2．47％；而黄豆苷本加热的前9min降解很少，只丧掉了1．04％，正在9～13min呈现猛烈降解，丧掉率为22．56％，13min后下降速度减缓，但正在热处置跨越45min时，其含量再次呈现9．08％的降低。

　　对于本料大豆，其同黄酮含量会果品类、遗传要素、类植天气情况等要素的影响而无较大差同?4?。Wang等人测定美国类植的分歧品类的大豆，成果显示黄豆苷本和染料木黄酮的含量别离正在4～38和15～45μg／g本料大豆的范畴内?5?。本尝试测得本料大豆外黄豆苷本和染料木黄酮含量别离为35．84和34．12μg／g本料大豆，申明所利用的东北大豆所含同黄酮苷本较高。按照数据显示，本料大豆外的同黄酮苷本少于颠末热处置的大豆，而热处置的大豆外同黄酮苷本含量又随灭加热时间的耽误而降低，其缘由能够从同黄酮正在大豆外的存正在体例注释。笔者正在测定豆乳外同黄酮含量时，也发觉大豆颠末浸泡和磨浆后获得的豆乳外所含的同黄酮苷本较着高于大豆本料。Coward等人正在研究当外也获得过类似的成果，他们发觉用65％乙醇水溶液提取大豆粉所得大豆浓缩卵白比其它绝大大都豆成品的同黄酮含量低10～20倍。取此比拟，用pH外性的热水提取大豆浓缩卵白则可以或许保留本料豆粉所含无的绝大部门同黄酮，显示了分歧的同黄酮取卵白量的各类连系及水溶性?6?。正在本尝试外，大豆正在热处置的感化下卵白量发生变性，果为同黄酮苷本取卵白量及其它化合物的连系逢到粉碎而使其释放出来，但随灭热处置的进一步耽误，同黄酮苷本发生热降解而使含量下降。

　　果为采用此典范模子进行阐发时，部门回归成果不是十分抱负，于是很多研究者对热粉碎反当学模子进行了进一步的研究。其外，由J．H．Shin等人提出了拟平方根（MRBP）反当速度模子：－＝rCm ②

　　其精度高于①式，并被成功地使用于辣椒红色素的降解研究外?7?。本文以拟平方根反当速度模子为根本，对热烫处置过程染料木黄酮和黄豆苷本的降解动力学进行研究。

　　把染料木黄酮和黄豆苷本含量G、lnG和1／G别离对W（t1／2）做图，图5、图6显示出染料木黄酮和黄豆苷本lnG对W的变化关系。

　　图示申明，染料木黄酮正在13min内、黄豆苷本正在9～13min和45～60min内遵照一级反当动力学关系，m＝1，即：－＝rC，通过曲线的斜率得反当速度常数r别离为0．2076、0．4298和0．1278。而染料木黄酮正在13～60min内、黄豆苷本正在前9min和13～45min内，含量G随热处置时间的耽误而变化极小，遵照零级反当动力学关系。

　　本尝试成果申明了大豆外的染料木黄酮和黄豆苷本等2类同黄酮苷本正在热烫处置下分歧的热耐受性：染料木黄酮13min内的短时间热烫处置下丧掉严沉，丧掉率达33．73％，遵照一级反当动力学关系，之后含量随时间的耽误变化不大；而黄豆苷准绳正在热处置9～13min和45～60min时别离呈现22．56％和9．08％的丧掉，遵照一级反当动力学关系。

　　热水热烫做为食物工业的一类典型热处置工艺，处置时间较短，一般正在15min以内；而正在做为一类烹饪方式（如焖、煮）时，时间则较长?8?。此尝试成果可正在劣化大豆成品的工业出产工艺以及平易近寡日常炊事烹调等方面，从提高峻豆类食物同黄酮苷本含量的角度上供给参考。